Tip:
Highlight text to annotate it
X
Välkommen till Novus Visual Protocol serien.
I den här filmen får du lära dig hur du utför alla faser av fluorescerande
immunocytokemi med de vanligaste metoderna för denna analys.
Innan du börjar ICC förfarandet,
Vi kommer att visa hur man förbereder täckglas och cell plattor kultur
följt av plätering av våra celler.
Vi börjar med syra behandla nya täckglas i en molar av saltsyra för
24 timmar.
Efter att noggrant dekantering av syran och ta bort täckglas,
Vi tvättar alla med destillerat vatten,
då en slutlig sköljning med etanol.
Som ett valfritt steg kan du placera täckglasen i en underskikt rack dränka
i en .1 mg / ml lösning gelatin eller polylysin
under fem minuter.
Dessa beläggningar medhjälpare att tillhandahålla ytterligare vidhäftning av celler till
täckglas säkerställer att de inte lossnar under senare tvättsteg.
Efter behandling bort grundskikt rack och torka täckglasen i kulturen
huva eller en uppvärmd ugn.
Rena torra täckglasen införes därefter i varje brunn i en sex väl kultur
tallrik
och täcktes med ett lock.
För att spara tid kan stora volymer av plattor beredas i förväg för senare användning.
Plattorna kan också steriliseras genom att placera dem under huven UV ljus.
Med rena täckglas framställda i sex brunnar, kan vi nu lägga våra celler.
Platted här i celler lägger en densitet av en halv miljon celler per brunn.
Celler odlas sedan över natten i inkubator eller tills de når önskad
densitet.